闌尾炎動物模型

方法  成年大鼠，后固定，無菌條件下開腹，將闌尾及末端回腸和與闌尾系膜相連的腸段(下稱臨近腸段)移出腹腔并置壁上。剪開闌尾尖部的闌尾系膜，把闌尾尖部腸內(nèi)容物擠至闌尾近端腸腔內(nèi)，距尖部1cm處用1號絲線將闌尾管攀結(jié)扎。把結(jié)扎了的闌尾尖部擺放在回腸根部和臨近腸段之間。用小圓針細絲線(000號)把回腸根部和臨近腸段相應(yīng)位置縫合一針(僅穿透漿肌層)，后將結(jié)扎闌尾包埋于其下。再順續(xù)沿末端回腸由遠端至近端與臨近腸段相應(yīng)位置緊密縫合1～2針，將闌尾全部包埋在縫合的腸段之下。將外置的全部腸段送入腹腔，兩層縫合關(guān)腹，無菌紗布包扎傷口，送回籠中飼養(yǎng)觀察?；虺赡昙彝茫蠊潭ㄓ?**臺架上，備皮消毒鋪巾后，無菌條件下腹正中切口開腹6cm，小鼠動物實驗***外包，尋及盲腸提出闌尾，于闌尾根部以4號絲線緊貼闌尾壁穿過系膜結(jié)扎闌尾，隨后將闌尾納回腹腔，逐層關(guān)腹。術(shù)后，在規(guī)定的時間點測定動物體溫，行壞死闌尾炎腔內(nèi)容物***培養(yǎng)，包囊或壞死闌尾大小的檢測，以及肉眼病理觀察和***形態(tài)學(xué)改變的鏡檢。

特點  大鼠術(shù)后15d，闌尾呈膿性壞死，外裹一層纖維性包囊，囊內(nèi)含有大量的***，模型成功率高。兔術(shù)后6～12h，闌尾充血、增粗、水腫；12～24h時，闌尾腫脹、增粗更為明顯，外被膿苔與周圍腸管粘連，北京動物實驗外包，部分闌尾壁可見斑點狀出血灶，腹腔內(nèi)有膿性滲液出現(xiàn)。與闌尾膿苔粘連的周圍腸管亦呈明顯的水腫、充血，甚或有闌尾系膜形成。腹腔滲液***培養(yǎng)有大腸生長。術(shù)后24h，兔體溫可升至40℃左右。在整個造模過程中，模型動物神態(tài)萎靡，不食不飲，腹部脹滿，2～4d內(nèi)陸續(xù)。

根據(jù)GB19489-2004實驗室 生物 安全通用要求，動物實驗室的 生物 安全要點:

動物實驗室的生物安全防護設(shè)施應(yīng)參照BSL1-4實驗室的要求，還應(yīng)考慮對動物呼吸、排泄、毛發(fā)、抓咬、掙扎、逃逸、動物實驗（如染毒、***檢查、取樣、解剖、檢驗等）、動物飼養(yǎng)、動物及排泄物的處置等過程產(chǎn)生的潛在生物危害的防護。應(yīng)特別注意對動物源性氣溶膠的防護，例如對動物的剖檢應(yīng)在負壓剖檢臺上進行。

應(yīng)根據(jù)動物的種類、身體大小、生活習(xí)性、實驗?zāi)康牡冗x擇具適當(dāng)防護水平的、于動物的、符合***相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的 生物安全柜 、動物飼養(yǎng)設(shè)施、動物實驗設(shè)施、消毒設(shè)施和清洗設(shè)施等。

實驗室建筑應(yīng)確保實驗動物不能逃逸，非實驗室動物（如野鼠、昆蟲等）不能進入。實驗室設(shè)計（如空間、進出通道等）應(yīng)符合所用動物的需要。

動物實驗室空氣不應(yīng)循環(huán)。動物源氣溶膠應(yīng)經(jīng)適當(dāng)?shù)倪^濾/消毒后排出，***動物實驗外包，不能進入室內(nèi)循環(huán)。

如動物需要飲用無菌水，供水系統(tǒng)應(yīng)可安全消毒。

動物實驗室內(nèi)的溫度、濕度、照度、噪聲、潔凈度等飼養(yǎng)環(huán)境應(yīng)符合***相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的要求。

前l(fā)ie腺素E2對大鼠巨噬細胞株NR8383 合成血管內(nèi)皮生長因子促進人臍靜脈血管內(nèi)皮細胞成管、遷移的影響

　　方法：分別采用0.1 nmol/L PGE2、1 nmol/L PGE2、1 nmol/L PGE2+10 nmol/L EP2受體抑zhi劑AH6809+10 nmol/L EP4受體抑zhi劑AH23848 處理的NR8383 細胞作為各實驗組，選擇未經(jīng)PGE2以及其特異性受體抑zhi劑處理的NR8383 細胞作為對照組，采用Western blot 和qPCR方法檢測各組NR8383細胞內(nèi)VEGF蛋白以及mRNA的表達水平；收集以上各處理組的細胞培養(yǎng)上清液分別刺激1HUVECs，運用TRANSWELL 小室、Matrigel 膠細胞成管實驗等實驗方法，觀察PGE2調(diào)控巨噬細胞對HUVEC 遷移效應(yīng)和成管能力的影響。

　　結(jié)果：隨著NR8383 細胞培養(yǎng)液中加入PGE2濃度增gao，動物實驗課題外包選哪家，其 VEGF蛋白表達和VEGF mRNA的表達水平顯著升高（P<0.05）；0.1 nmol/L、1 nmol/L PGE2處理過的NR8383細胞培養(yǎng)上清液可以顯著增加HUVEC細胞形成的小管面積，形成小管面積隨著PGE2處理濃度的增加而增加（P<0.05）；HUVECs的遷移運動也隨著PGE2處理濃度的升高不同程度的增強，HUVECs趨化的數(shù)量顯著升高（P<0.05）；研究發(fā)現(xiàn)PGE2特異性的EP2/EP4 受體拮抗劑AH6809/AH23848，可以顯著***PGE2 增強NR8383 細胞內(nèi)VEGF mRNAs 表達的作用并且也顯著***PGE2 增強 NR8383細胞促進HUVECs成管和趨化能力的效應(yīng)（P<0.05）。

　

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